分子实验 · 蛋白质

蛋白质分子量计算 · 序列一贴,MW 与 pI 都有

输入氨基酸序列(单字母),算出分子量、等电点 pI、长度与氨基酸组成,用于配胶、透析与浓度换算。

MW = Σ残基质量 + H₂O平均残基质量约 110 DapI:净电荷为 0 时的 pH1 mg/mL ≈ 1 A280(依消光系数)
氨基酸序列单字母表示

用单字母氨基酸代码,如 MKWVTFISLL;不识别空格与数字。

AI 讲解需人机验证
算法会算,AI 会讲为什么
计算结果等待输入
分子量
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分子量
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等电点 pI
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序列长度
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平均残基质量
—
计算过程
  1. 填入数据后点「计算」,这里给出代入过程。
常用残基质量
残基质量 Da残基质量 Da
Gly G57.05Ala A71.08
Val V99.13Leu L113.16
Phe F147.18Trp W186.21
Cys C103.14Met M131.19

分子量怎么加出来的

蛋白质由氨基酸通过肽键连接,每形成一个肽键脱去一分子水。所以 MW = Σ(残基质量) + 18.015(两端 H 与 OH)。

粗略估算可用「氨基酸数 × 110 Da」,但含大量 Gly 或 Trp 的蛋白偏差较大,正式实验要用精确值。

pI 的用途

  • 等电点沉淀:在 pI 附近溶解度最低
  • 离子交换层析:pH>pI 带负电,结合阴离子柱
  • 电泳:pI 决定蛋白在凝胶中的带电状态
  • 缓冲液选择:避免 pH 接近 pI

常见问题

pI 是精确值吗?

是基于常用 pKa 的理论近似值,实际值受缓冲体系与修饰影响,可用等电聚焦验证。

修饰基团算进去了吗?

没有。磷酸化、糖基化、标签都会增加质量,需要额外加。

带 His-tag 要加多少?

6×His 约 0.84 kDa,加上连接肽按实际序列计算更准。

为什么跑胶位置和计算值不同?

SDS-PAGE 受电荷、形状、修饰影响,膜蛋白常出现异常迁移。

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