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胶浓度经验值:<100 bp 用 3%、100~250 bp 用 2%、250~500 bp 用 1.5%、
500~1000 bp 用 1.2%、1~3 kb 用 1.0%、>3 kb 用 0.7%。琼脂糖克数 = 体积 × 浓度%(m/v)。
电压按 5 V/cm 电极距设置,时间以条带迁移 4~6 cm 估算,实际以染料前沿位置为准。
跑胶参数不用再翻笔记:输入目标片段大小,自动给出琼脂糖浓度经验值;按配胶体积算出琼脂糖克数,按电极间距算建议电压(5 V/cm 且不超过槽上限),电泳时间按条带迁移距离估算;每孔上样量按 50~200 ng 提示,胶浓度与片段大小匹配关系一览。
胶浓度决定分辨率:低浓度胶跑大片段、高浓度胶跑小片段,浓度选错要么条带挤成一团要么跑散。工具按目标 bp 自动推荐浓度,配胶体积选择后直接算琼脂糖克数(1×TAE 或 1×TBE 微波融化即可);电压按 5 V/cm 折算并受电泳槽上限约束,防止「电压拉满发热拖尾」;时间按目标条带迁移 4~6 cm 的经验速率估算,短片段时间短、大片段拉长。每孔上样 50~200 ng 的常规区间与染料提示一并给出,新人带教直接发这个页面。
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